染色体跳跃

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该方法适用于目标基因与可得最近的molecular marker距离较远时,目标基因的原位克隆(positional cloning)。建立跳跃文库历经二次限制性内切酶切割与载体重组。先将染色体的DNA用识别序列长的限制性内切酶切割成较大的片段,并用DNA ligase 环化此次酶切所得大片段,进行克隆。然后对克隆的基因再次酶切,以剪下之前环化片段的连接区域,该区域包含了之前大片段两端的基因序列,该序列可由southern blots来识别,即将片段与原始分子探针进行杂交。由此获得的DNA文库即跳跃基因组文库。因为此时的第一次重组而且位于中间的质粒两侧的基因组原本在染色体中实际上不仅不相临,而且至少有百万碱基距离的间隔。染色体跳跃(chromosome jumping)在较大的染色体,如人类的染色体相关的工作中有极大的应用。[1] 
参考资料
  • 1.    D.Peter Snustad Michael J.Simmons .Genetics.U.S.:Wiley,2012:408-409
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理学 游戏 其他